抗體指機(jī)體的免疫系統(tǒng)在抗原刺激下，由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。主要分布在血清中，也分布于組織液及外分泌液中。
 

　　抗體具有嚴(yán)密的三維結(jié)構(gòu)，已進(jìn)化成為在大多數(shù)生物環(huán)境中，甚至機(jī)體大面積創(chuàng)傷時(shí)也能保持其活性?？贵w緊湊的三維結(jié)構(gòu)使抗體能抵御輕度變性的環(huán)境，從而也使抗體的長(zhǎng)期存放較為容易。通常需要將甘油或其他穩(wěn)定劑加到儲(chǔ)存的緩沖劑中，以保持實(shí)驗(yàn)室中純化的蛋白活性。
 

　　抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)既可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行，也可以在機(jī)體外進(jìn)行。在機(jī)體內(nèi)，當(dāng)免疫細(xì)胞被抗原激活后，由B細(xì)胞分化成熟為漿細(xì)胞后所合成、分泌的一類能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白(immunoglobulin，Ig)，激活補(bǔ)體系統(tǒng)從而解除抗原對(duì)機(jī)體的損傷?？贵w反應(yīng)的主要特點(diǎn)有：
 

　　1、特異性：特定的抗體只能與特定的抗原(肽段/蛋白)結(jié)合，這在WB一抗二抗的種屬及反應(yīng)性的選擇常用到；
 

　　2、可逆性：結(jié)合是非共價(jià)結(jié)合，在一定條件下這種非共價(jià)結(jié)合是可逆的；因此，同一NC膜/PVDF膜在Stripping(抗體洗脫)以后可以用來檢測(cè)其他蛋白；
 

　　3、比例性：在整個(gè)反應(yīng)中存在一定的量比關(guān)系，只有當(dāng)二者濃度比例適當(dāng)時(shí)才出現(xiàn)可見反應(yīng)；WB中蛋白上樣量和一抗二抗的稀釋比例與此有關(guān)，實(shí)際操作中抗體的量相對(duì)較多，這也是為何抗體可以反復(fù)使用的原因之一；
 

　　4、階段性：特異性反應(yīng)分兩階段，第一階段反應(yīng)迅速，第二階段反應(yīng)緩慢，兩階段均為特異性結(jié)合；WB中抗原抗體結(jié)合在室溫下，反應(yīng)1小時(shí)結(jié)合率可達(dá)95%，2小時(shí)可達(dá)97%以上；4℃在，反應(yīng)4-6小時(shí)可達(dá)90%，8小時(shí)可達(dá)95%(本人忘記了具體的數(shù)值，但大致如此)。